多重PCR法检测巴氏杀菌驼乳中金黄色葡萄球菌肠

浏览:    时间:2021-03-06 15:36

摘要:金黄色葡萄球菌菌株可引起人类和动物疾病。它们的致病性是由于毒素产生和菌株的抗生素抗性性质。此外,金黄色葡萄球菌菌株是食源性致病菌被称为产毒菌株。由金黄色葡萄球菌(

金黄色葡萄球菌菌株可引起人类和动物疾病。它们的致病性是由于毒素产生和菌株的抗生素抗性性质。此外,金黄色葡萄球菌菌株是食源性致病菌被称为产毒菌株。由金黄色葡萄球菌(SES)产生的白细胞介素,可分为五种类型,包括血清,SEA,SEB,SEC,SED,。葡萄球菌肠毒素A(SEA)和E(SEE)的基因是由温带噬菌体携带的。Enterotoxins B(SEB)和C(SEC),以及毒性休克综合征毒素1(TSST-1)位于染色体,而肠毒素D(SED)和J(SEJ)由质粒携带。一般来说,牛奶是金黄色葡萄球菌生长的良好培养基。葡萄球菌毒素是非常耐热的。肠毒素在巴氏杀菌或121℃加热28分钟后仍保持一定的生物活性。

(驼奶招商代理) 驼乳被认为是沙特阿拉伯和其他几个阿拉伯国家消费的重要的乳品类型之一。尽管骆驼奶被认为对大多数通常影响其他家畜的疾病具有免疫力,但人们发现,骆驼奶中含有大量的微生物,威胁着小牛的生命。驼乳被发现含有引起乳腺炎的几种细菌,如葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、假单胞菌、棒状杆菌和结核分枝杆菌,以及曲霉、念珠菌和隐球菌等真菌。

(驼奶招商代理) 所有这些微生物都可以侵入乳头和乳腺,细菌可以扩散并产生毒素,从而影响组织中的乳汁分泌,导致体细胞计数增加。研究发现,生的和巴氏杀菌的骆驼奶可能受到金黄色葡萄球菌的污染,金黄色葡萄球菌是从动物身体的不同部位引入的,或通过处理方法、各种加工步骤或不卫生的环境条件引入的。骆驼奶通常在63°C下巴氏杀菌30分钟或72°C下巴氏杀菌15秒。金黄色葡萄球菌是通过这种方式从牛奶中分离出来的;这种微生物的存在不受巴氏杀菌的影响,并保持活性,这导致人们认为这些菌株可能更耐热。这些已知的金黄色葡萄球菌菌株,表现出耐热性和产生毒素C(SEC),被认为与其他在正常巴氏杀菌过程中可灭活的毒素产生菌株相比更危险和对人体健康有害。

(驼奶招商代理) 图1 多重毒素基因引物(A、B、C、D和E)进行PCR 图2 金黄色葡萄球菌肠毒素C产生菌的热致死时间曲线 本研究的目的是研究从利雅得当地市场出售的巴氏灭菌骆驼奶中分离到的金黄色葡萄球菌菌株。研究了菌株在不同温度下的耐热性和在多重聚合酶链反应(PCR)中存在编码sec的基因。在培养基和实验室灭菌乳中对该菌群进行耐热性检测,并用特异性引物进行多重聚合酶链反应(PCR)鉴定其组成。通过使用单独的特异性引物进行进一步验证。所鉴定的菌株分别在65、72、80、85和90℃下热处理30、15、10、5和2分钟后存活。当金黄色葡萄球菌肠毒素产生菌株对热处理表现出异常抗性时,获得了不可预知的结果。通过DNA测序,将PCR片段中的肠毒素基因鉴定为肠毒素C。

(驼奶招商代理) 在基本的局部比对搜索工具(BLAST)分析中,分离的肠毒素C基因与金黄色葡萄球菌SAI48金黄色葡萄球菌肠毒素C变异V4(SEC)基因的已发表的数据库序列显示出99%的相似性。在10℃下测定了90°C(D90)的小数减少值(D值),这是报道了这种异常耐热和产肠毒素的金黄色葡萄球菌。使用高温(UHTs)对于减少或杀死骆驼奶中的细菌是可取的,尤其是在许多骆驼奶工厂遇到这种问题时。

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