应用聚合酶链-反应侧流免疫法鉴定食品中的骆驼

浏览:    时间:2021-03-06 15:32

摘要:自从欧洲发生马肉丑闻以来,人们对肉制品真伪的担忧与日俱增,特别是对高质量、高需求和奢侈的肉类品种。标签上除申报品种外,其他品种替代、掺假的产品,损害消费者的信任,

自从欧洲发生马肉丑闻以来,人们对肉制品真伪的担忧与日俱增,特别是对高质量、高需求肉类品种。标签上除申报品种外,其他品种替代、掺假的产品,损害消费者的信任,影响市场和经济。在某些情况下,食品欺诈会带来健康风险,如意外接触可能导致过敏反应。因此,有效的肉类认证技术可以监控食品链(如政府实验室)和食品工业。 随着对骆驼肉需求的增加,骆驼肉相关食品容易受到食品欺诈的影响。为了有效地鉴别骆驼类食品,建立了一种基于聚合酶链反应(PCR)的检测技术—侧流免疫分析(LFI)。

(驼奶代理) 设计骆驼特异性PCR引物,以线粒体COI基因为靶点。硅片和卵黄蛋白都证实了PCR-LFI的特异性。牛肉中骆驼肉的检出限为0.1%(w/w),无论是生的还是熟的(即煮沸和油炸)。利用该方法对20种从中国当地杂货店和网上购买的加工骆驼肉产品进行了鉴定。网上购买的两种产品被鉴定为不含骆驼肉。 图1骆驼种特异性聚合酶链反应(PCR)引物的检测性试验;用琼脂糖凝胶电泳(A)侧流免疫分析(B)对PCR产物进行了观察;200 bp DNA梯中的M道;A、B道:NC,水为阴性对照;1-9,100%、50%、25%、10%、5%、1%、0.1%、0.01%、0.001%浓度的骆驼肉配牛肉 图2 应用聚合酶链反应侧流免疫法对20种商品骆驼产品进行真伪检验。PC,阳性对照;NC,阴性对照;1-20,从当地不同杂货店和网店购买骆驼产品 建立了一种新的用于骆驼肉鉴别的种特异性PCR-LFI方法。通过对加工骆驼肉制品中22种潜在成分和18种潜在成分的体外和体内试验,证实了该方法的高度特异性。采用PCR-LFI技术,对生熟(即煮熟和油炸)骆驼肉样品进行检测,得到了0.1%w/w骆驼肉的检出限。

(驼奶代理) 应用该方法对20种从当地杂货店和网店购买的含骆驼食品进行了分析,结果与工业标准化方法所得结果一致。与琼脂糖凝胶电泳法相比,基于LFI条带的PCR产物的LOD降低了10倍,节省了大量的分析时间。这种新的PCR-LFI方法被推荐给政府实验室用于含骆驼肉食品的快速鉴定。此外,它可以很容易地推广到分析其他肉类品种,甚至可以实现多品种检测。

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